Porque tais estudos ainda não se encontram concluídos, torna-se imperioso e urgente unificar, em todos os laboratórios, os processos a seguir nos referidos ensaios.
Assim, tendo em atenção a parte final do n.º 7.º da Portaria 13201, de 19 de Junho de 1950, ouvida a subcomissão a que o assunto está directamente ligado:
Manda o Governo da República Portuguesa, pelo Secretário de Estado da Indústria, que sejam adoptados os seguintes processos analíticos:
Ensaio de Bellier-Carocci-Buzi
Preparação da amostra:Procede-se como se encontra determinado pelos n.os 4, 5 e 6 dos métodos gerais da Portaria 10134, de 9 de Julho de 1942 (métodos oficiais para análise das gorduras alimentares), para homogeneização, eliminação de água, se for necessária, e filtração.
Reagentes:
I) Dissolvem-se 8,5 g de hidróxido de potássio em 14,4 ml de água destilada e completa-se o volume de 100 ml com álcool etílico a 95 por cento em volume, a 20ºC.
II) Dilui-se a 1 + 2 ácido acético glacial em água destilada e acerta-se de modo que 1,5 ml neutralizem, à fenolftaleína, 5 ml do reagente I).
Processo:
Medem-se por pipetas e introduzem-se em frasco de Erleinmeyer de 100 ml 1 ml de gordura e 5 ml do reagente I). Adapta-se ao frasco um tubo de refluxo e, agitando de vez em quando, leva-se à ebulição sobre banho-maria, até saponificação completa, que se obtém em menos de 20 minutos.
Deixa-se arrefecer até à temperatura do ambiente e adiciona-se 1,5 ml do reagente II), medidos por pipeta, e depois 4 a 5 gotas de ácido acético glacial.
Aquecem-se à parte, até 45ºC, 50 ml de álcool etílico a 70 por cento em volume a 20ºC e adicionam-se à mistura. Introduz-se um termómetro, aquece-se até 45ºC e deixa-se arrefecer, agitando moderadamente. Durante o arrefecimento observa-se o líquido. Se este estiver límpido a 40ºC e assim permanecer até 15,5ºC, o resultado do ensaio é negativo.
Se o líquido estiver turvo logo de início ou turvar a temperatura superior a 40ºC, há suspeita de resultado positivo.
Se o líquido turvar no decurso do arrefecimento até 15,5ºC, toma-se nota da temperatura a que tem início essa turvação.
Deixa-se em repouso durante três horas à temperatura do ambiente, não inferior a 18ºC.
Se existe, ou está formando, um precipitado em suspensão, leve, com aspecto de pequenas nuvens, há suspeita de resultado positivo; mas se o precipitado for de aspecto cristalino e tende a depositar, há, porém, a suspeita da presença de ácidos araquídio e lignocérico, devido a adição de óleo de amendoim, da qual já pode haver conhecimento pela determinação prévia do índice de Bellier.
Mantém-se em repouso, pelo menos 24 horas, à temperatura ambiente não inferior a 18ºC, e observa-se novamente o aspecto do líquido.
Se há precipitado leve, mas volumoso, aparentemente não cristalino, de aspecto semelhante a pequenas nuvens, não depositado no fundo do frasco, mas em suspensão no líquido, o resultado do ensaio é positivo. Um precipitado de aspecto cristalino que se encontre depositado no fundo do frasco apenas indica a presença de ácidos araquídico e lignocérico.
Ensaio de Vizern-Espejo
Processo:Dissolve-se, aquecendo ligeiramente, em 10 ml de álcool etílico a 95 por cento em volume, a 20ºC, o insaponificável da gordura determinado pelo método de Hönig e Spitz modificado (Wizöff), conforme o n.º 24 dos métodos gerais, dos métodos oficiais para análise das gorduras alimentares e segundo o texto da Portaria 13698, de 10 de Outubro de 1951.
Transfere-se para copo de 250 ml, lavando com mais 10 ml de álcool etílico a 95 por cento em volume, a 20ºC.
Adicionam-se 5 ml de água oxigenada a 10 por cento (34,2 volumes), ou aproximadamente a 30 volumes, e evapora-se à secura em banho-maria.
Dissolve-se, aquecendo ligeiramente, em 20 ml de álcool etílico a 95 por cento em volume, a 20ºC, adicionam-se 5 ml de água oxigenada a 10 por cento, ou aproximadamente a 30 volumes, e evapora-se à secura como anteriormente.
Retira-se do banho-maria e dissolve-se por completo em 20 ml de álcool etílico a 85 por cento em volume, a 20ºC, aquecendo de modo que não haja perda de etanol, a fim de não diminuir a concentração.
Filtra-se imediatamente por filtro de papel de 7 cm a 9 cm de diâmetro e de porosidade média (papel Whatman n.º 41 ou n.º 541), recolhendo o filtrado em tubo de ensaio e arrefece-se.
Decorrida uma hora, observa-se o líquido. Se estiver perfeitamente límpido, o resultado do ensaio é negativo. Se, porém, não estiver límpido, observa-se de novo depois de decorridas mais três horas.
Se o líquido apresentar precipitado em suspensão e reunido em flocos, o resultado do ensaio é positivo. Porém, se o precipitado não se apresentar flucunoso, o resultado do ensaio é negativo.
Secretaria de Estado da Indústria, 5 de Agosto de 1963. - Pelo Secretário de Estado da Indústria, José Luís Esteves da Fonseca, Subsecretário de Estado da Indústria.
